Το Πανεπιστήμιο του Καρόλου (τσέχ.: Univerzita Karlova) είναι το παλαιότερο και μεγαλύτερο τσεχικό πανεπιστήμιο και μεταξύ των παλαιότερων πανεπιστημίων στην Ευρώπη, ιδρύθηκε το 1348 στην Πράγα από το βασιλιά Κάρολο τον Δ΄. Έχει πάνω από 45.000 φοιτητές.
Σύμφωνα με την πρόσφατη ακαδημαϊκή ταξινόμηση των παγκόσμιων πανεπιστημίων από το πανεπιστήμιο της Σανγκάης Jiao Tong είναι ένα από τα καλύτερα Πανεπιστήμια στην Κεντρική και Ανατολική Ευρώπη, μαζί με το πανεπιστήμιο του Szeged στην Ουγγαρία.
Ο Βάτσλαβ Χάβελ είχε διοριστεί πρόεδρος του Πανεπιστημίου το 1990 και αργότερα έγινε πρόεδρος τις Τσεχικής Δημοκρατίας.
Στο ξεκίνημα του, το πανεπιστήμιο αποτελούταν από 4 τμήματα. Σήμερα το πανεπιστήμιο του Καρόλου αποτελείται από 17 σχετικώς ανεξάρτητα και αυτοδιοικούμενα τμήματα που βρίσκονται στην Πράγα, στο Πίλζεν και στο Χράντεκ Κράλοβε.
Τα τμήματα του Πανεπιστημίου είναι: